0.5%即用型链蛋白酶
即用型链蛋白酶用于消化卵母细胞外围透明带。
品名 | 型号 | 规格 | 有效期 | 分子量 | 含量 | 备注 |
0.5%即用型链蛋白酶 | M1251 | 1ml*10支/盒 | 12个月 |
-20℃(有效期见外标签)。
本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。
成分及用途
0.5%链蛋白酶(Pronase E)溶液,无菌,基础液为M2,含BSA、庆大霉素、酚红,可在空气中维持pH值稳定。本产品用于快速消化卵母细胞或胚胎的透明带,获得无透明带卵母细胞或卵裂球。
提醒:如果需要消化卵丘复合物(COC)获得裸卵,需要使用即用型透明质酸酶(型号M2215)。
使用方法
室温解冻,颠倒混匀后按下图做皿。如一支未用完,可4-8℃冷藏3天,长期不用需放回-20℃冻存,请勿反复冻融。
1、 请按照下述示意图的指示,使用M2培养液与0.5%浓度的链蛋白酶,在35mm胚胎培养皿内做微滴,并覆盖胚胎培养用矿物油(石蜡油)。接着,将培养皿放置于恒温热台或培养箱进行预热处理(此温度条件下酶的活性达到最佳状态。)
2、 在此过程中,需密切注意显微镜下的观察,请勿待透明带完全消失后才进行转移,以免因消化时间过长而对卵母细胞造成不可逆损伤。随后,用拉制的毛细玻璃管,将卵母细胞转移至邻近的M2培养液中,继续在M2液滴内进行适度的吹打处理,直至透明带完全剥离或消失。若经过多次吹打后透明带仍旧残留,则需再次将卵母细胞转移回链蛋白酶液滴中,进行数次的吹打操作后,再将其移出。
3、 对于已经完全去除透明带的卵子,需在M2微滴中进行多次清洗,以彻底去除残留的酶。清洗完毕后,将卵母细胞转移至其他适宜的培养液中,并放入CO2培养箱中备用。
产品图片
显微镜下图片展示
卵丘复合物
裸卵(经过透明质酸酶消化过后)
去除透明带之后的卵细胞(经过链蛋白酶消化过后)