IVM未成熟卵培养液 M2115

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IVM未成熟卵培养液 M2115

体外受精试剂耗材 2021-01-13

IVM未成熟卵培养液可用于在10-24小时内将未成熟卵（GV）培养至MII。其中添加了EGF、重组FSH可有效提高成熟率及受精率。

品名	型号	规格	有效期	备注
IVM未成熟卵培养液	M2115	10ml/瓶	12个月	含BSA、双抗、FSH、EGF、酚红

保存条件及有效期：4-8℃避光冷藏有效期为3个月，-20℃冻存有效期为一年。

本产品仅供科研使用，请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

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使用方法

●-20℃冻存，室温或掌心加热解冻，请勿水浴加热，解冻期间反复颠倒混匀数次，请勿剧烈震荡。解冻后应4-8℃避光保存，开封后应在3周内用完。

●本产品出厂已通过鼠胚质控，由于可能存在运输及保存问题，本培养液解冻后必须做预实验验证。请勿分装冻存，分装可能会导致渗透压改变以及污染等问题。解冻后必须反复颠倒混匀，静置解冻后培养液会出现从上到下的浓度逐渐增加的渗透压梯度，用未混匀培养液会出现胚胎放入几小时后死亡的情况。

●使用前请做滴盖油，至少在CO2培养箱内平衡4小时，建议提前过夜平衡。

●本产品为即用型无菌培养液，已添加BSA、庆大霉素、酚红。

●可定制不同组分培养液。

小鼠未成熟卵IVM方法（仅供参考）

●雌鼠注射PMSG 5-10IU/只， 48小时后杀鼠获取卵巢，在M2培养液中用1ml注射器针头或胰岛素针头反复戳卵巢至棉絮状，在皿底寻找类似于煎鸡蛋结构的未成熟卵coc（颗粒细胞没有扩散紧密包裹在卵母细胞周围）。

●如果需要获取GV阶段裸卵，用拉制的90-100um针反复吹打未成熟卵coc，机械性剥离颗粒细胞。注意此时不需要用透明质酸酶消化颗粒细胞，因为GV卵的颗粒细胞没有表达相应的透明质酸，因此无法用透明质酸酶消化GV卵COC，只能用机械剥离。

●将未成熟卵coc放入提前平衡的IVM培养液中培养16-18h。注意：未成熟卵coc是完整的颗粒细胞包裹GV卵的coc，不是GV裸卵，在皿底可以同时找到未成熟卵coc和GV裸卵，如果需要IVM培养，GV裸卵应该是废弃的，因为GV发育至MII，需要包裹卵母细胞的颗粒细胞与卵母细胞进行信号交互调控，从而达到核质同步成熟。GV裸卵没有颗粒细胞参与调控，虽然16小时后也排出第一极体，但这只是核成熟，胞质还未成熟，会影响实验结果。

产品成分

IVM成分表.png

质量控制

●渗透压：300±3mOsmol。

●pH：7.2-7.4。

●通过无菌、无支原体及鼠胚检测。