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玻璃化冷冻解冻液 胚胎冷冻 卵子冷冻 M1915 M1815

体外受精试剂耗材 2021-01-13

玻璃化冷冻技术的基本原理是将胚胎放入高浓度冷冻保护剂经一定时间平衡后,胚胎体积可因脱水而减少30-50%,然后将胚胎置入特定冷冻载杆,再直接投入液态氮中使细胞内残存水分瞬间玻璃化,在无冰晶形成下保存,以减少细胞内结冰造成伤害。

本试剂盒适用于冷冻小鼠、大鼠等实验动物及人类卵母细胞卵母细胞-囊胚期的各个阶段,复苏率95%以上,复苏胚胎的囊胚形成率85%以上。

本试剂盒需配套专用玻璃化冷冻载杆(H0101)使用。

 品名型号规格有效期价格备注
玻璃化冷冻液M191510ml*2瓶/盒(两步法冷冻)3个月800元含BSA、双抗、酚红
玻璃化解冻液M181510ml*4瓶/盒(四步法解冻)3个月500元

含BSA、双抗、酚红 

玻璃化冷冻专用载杆,CryoleafH01011支/袋(无菌包装)50元室温保存

保存条件:4℃冷藏。

本产品仅供科研使用,请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。

  冷冻图片

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2cell ES初始阶段卵裂球脱水                                   ES 4min后卵裂球体积部分恢复

  解冻图片

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解冻后卵裂球体积逐步恢复的过程

  冷冻步骤(两步法)

(1) ES液和VS液各做200ul滴,在室温下复温5min。

(2) 将胚胎放入ES液中,平衡3min。

(3) 将胚胎从ES液中移入VS液,放置1min。

(4) 将胚胎转移到玻璃化冷冻载杆上,3-4步过程在1.5min内完成。为迅速降温跨越冰点,滴在载杆叶片上滴越小越好。

(5) 轻轻的将玻璃化冷冻载杆投入到液氮中,维持30秒,然后完全释放于液氮中。

(6) 用金属镊子在液氮液面下将玻璃化冷冻载杆帽子套上并装入载体支架(全过程中装载胚胎的叶片必须一直浸泡在液氮内),在冷冻登记本上做好相关记录。

(7) 整个冷冻过程关闭加热工作台,维持常温。


玻璃冷冻1.png                     玻璃冷冻2.png


  解冻步骤(四步法)

(1) 从冰箱中取出DM-1、DM-2、DM-3、WM液,各做200ul滴,DM-1滴放入37℃培养箱中5min加温至37℃,其余各滴在室温下复温5min。

(2) 将载有胚胎的玻璃化冷冻载杆在液氮面下用金属镊子脱下帽子取出,迅速将叶片置于DM-1液中,轻轻晃动载杆,镜下可见卵子或胚胎脱落至DM-1液中,放置1min。

(3) 将胚胎转移至DM-2液中,放置3min。

(4) 将胚胎转移至DM-3液中,放置3min。

(5) 将胚胎转移至WM液中,放置3min。

(6) 将胚胎转移至胚胎培养液中洗涤后,放入培养箱中培养。

(7) 整个冷冻过程关闭加热工作台,维持室温。为了迅速复温跨越冰点,解冻第一步DM-1液要保证37℃。后续解冻步骤在室温下进行。


玻璃解冻1.png


*注意事项:1.上述每步时间适用于小鼠胚胎。冷冻卵母细胞及囊胚请延长ES时间至5min,不同动物胚胎请先做预实验摸索冷冻解冻各步骤时间。2.产品出厂前均通过鼠胚质控。3.视频教程请咨询客服。